Определение алкалоидов в семенах люпина

Определение алкалоидов в сухих семенах (по Н. И. Иванову и М. И. Смирновой). У анализируемого семени со стороны, противоположной рубчику, острым скальпелем срезают кусочек семенной кожуры и высверливают часть семядоли на стекло, положенное на белую бумагу. Семя кладут рядом с высверленной пробой. Таким образом готовят все анализируемые семена и на каждую пробу из капельницы наносят одну каплю воды и одну-две капли реактива № 1. Появление красновато-бурого окрашивания свидетельствует о том, что содержание алкалоидов в семени превышает 0,1%. На неокрашенные пробы наносят одну-две капли реактива № 2 и при окрашивании пробы относят эти семена к малоалкалоидным с содержанием алкалоидов меньше 0,1%, но больше 0,025%. Семена с неокрашенной пробой относят к безалкалоидным, так как содержание алкалоидов в них меньше 0,025% или они вообще отсутствуют.

При оценке отдельных растений этим методом анализируют по нескольку семян с растения, причем проверенные семена сохраняют всхожесть и могут быть высеяны, что очень ценно в селекционной работе.

При использовании данного метода для проверки на алкалоидность образцов люпина определение проводят в двух повторностях по 100 семян в каждой. Результаты записывают по следующей форме:

2. Определение алкалоидности методом замачивания в холодной воде

3. Определение алкалоидов в сухих семенах

Задание. Определить алкалоидность в образце семян люпина методом предварительного кипячения, методом замачивания в холодной воде и в сухих семенах (высверливанием). Определить алкалоидность с использованием фильтровальной бумаги, пропитанной реактивом Драгендорфа, у растений люпина, выращенных в теплице.

Оборудование и материалы. Стеклянная пластина размером 15x20 см, скальпели или ланцеты, фильтровальная бумага, стаканы, марлевые салфетки или мешочки, нитки, сосуд для кипячения семян, пронумерованная палочка для привязывания образцов, чашки Петри, образцы семян.

Реактивы готовят следующим образом.

Реактив йода в йодистом калии: 2 г. йодистого калия растворяют в 3 мл воды в колбе на 100 мл. После полного растворения в колбу вносят 1,3 г. кристаллического йода, тщательно взбалтывают до полного растворения и доливают колбу до метки 100 мл. Этот раствор называется концентратом. Для приготовления раствора № 1 к 1 мл концентрата добавляют 19 мл воды, раствора № 2 — к 1 мл концентрата добавляют 9 мл воды. Растворы хранят в окрашенных склянках с притертыми пробками в темном месте.

Реактив Драгендорфа: 1,26 г. уксуснокислого или азотнокислого висмута растворяют в 75 мл 20% -ной уксусной кислоты (раствор «а»); 30 г. йодистого калия растворяют в 75 мл дистиллированной воды (раствор «б»). Оба раствора смешивают и доливают 210 мл 20%-ной уксусной кислоты. Этим реактивом пропитывают полоски фильтровальной бумаги, сушат их в темноте и хранят закрытыми до проведения анализа.